一、概要
萊克多巴胺(Ractopamine,RAC)是一種苯乙醇胺類β2-腎上腺素受體激動劑，具有廣泛的生理效應，臨床上主要用于治療支氣管哮喘，沖血性心力衰竭癥和肌肉萎縮癥等。當其用量高于臨床用量的5～10倍時，能調(diào)節(jié)體內(nèi)代謝，增加脂肪分解，促進蛋白合成，表現(xiàn)出營養(yǎng)再分配效應。添加于飼料中，極大的提高了家畜的瘦肉率。當人食用含有萊克多巴胺的動物組織后，極易產(chǎn)生心跳加快、震顫、心悸等中毒反應，更嚴重的會導致人體致畸致癌。 萊克多巴胺檢測試劑盒是應用ELISA技術(shù)研發(fā)而成的檢測產(chǎn)品，能最大限度地減少操作誤差和工作強度。

二、試驗原理
萊克多巴胺檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在酶標板微孔條上預包被萊克多巴胺抗原，樣本殘留的萊克多巴胺和微孔條上預包被的抗原共同競爭抗萊克多巴胺抗體，加入酶標二抗后，加入TMB底物顯色，樣本吸光度值與其殘留物萊克多巴胺呈負相關(guān)，與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數(shù)，即可得出樣品中萊克多巴胺的含量。

三、適用范圍:
萊克多巴胺檢測試劑盒可定性、定量檢測動物組織、飼料、尿液等樣本中萊克多巴胺的殘留量。

四、交叉反應率
萊克多巴胺 ………………………………………  100%
多巴酚丁胺 …………………………………………小于1%
鹽酸多巴胺?…………………………………………小于1%
克侖特羅 ………………………………………小于1%
沙丁胺醇 …………………………………………小于1%

五、提供的材料與試劑
酶標板、標準品×5瓶*、萊克多巴胺高濃度標準品100ppb、萊克多巴胺抗試劑、萊克多巴胺酶標物、底物液A液、底物液B液、終止液、濃縮洗滌液(10×) 萊克多巴胺濃縮樣品稀釋液(2×)

六、操作步驟： 
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20～25℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔放入自封袋，保存于2～8℃。
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。
4、編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
5  加標準品/樣本：加標準品/樣本50l/孔到對應的微孔中，然后加入萊克多巴胺抗試劑50l/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應30min。
6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌工作液250l/孔，充分洗滌4~5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。
7、加酶標物：加入萊克多巴胺酶標物100l/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應30min，取出重復洗板步驟6。
8、顯色：加入底物液A液50l/孔，再加底物液B液50l/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應15～20min。
9、測定：加入終止液50l/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀于450nm處（建議用雙波長450/630nm檢測，請在5min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測定每孔OD值。(若無酶標儀，則不加終止液用目測法可進行判定)。

七、方法靈敏度、準確度、精密度
試劑盒靈敏度：0.1ppb
樣本最低檢測限：
動物組織…………………………………0.1ppb
飼料樣本……………………………………5ppb
尿液樣本……………………………………0.1ppb
回收率：
動物組織………………………………………80±10%
飼料樣本………………………………………80±10%
尿液樣本………………………………………80±10%
精密度：試劑盒的變異系數(shù)均小于10%

八、注意事項
1、室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫（20～25℃）會導致所有標準的OD值偏低。
2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會出現(xiàn)標準曲線不成線性，重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
3、每加一種試劑前需將其搖勻。
4、反應終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。
5、不要使用過了有效日期的試劑盒；不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
6、儲存條件
保存試劑盒于2～8℃，不要冷凍，將不用的酶標板微孔板放進自封袋重新密封。標準物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
7、試劑變質(zhì)的跡象
發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì)，應當棄之。0標準的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時，表示試劑可能變質(zhì)。
8、在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時間為15～20min即可。若顏色較淺，可延長反應時間到30min。反之，則減短反應時間。
9、該試劑盒最佳反應溫度為25℃，溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

九、貯藏條件及保存期
貯藏條件：保存試劑盒于2~8℃。
保存期：該產(chǎn)品有效期為12個月。